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产品介绍
| 品牌 | 轩泽康 | 规格 | 96T,48T |
|---|---|---|---|
| 供货周期 | 现货 | 主要用途 | 仅用于科学研究,不得用于临床 |
| 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药 | 保质期 | 6个月 |
| 保存条件 | 2-8℃ | 检测方法 | 双抗一步夹心法 |
| 检测波长 | 450nm | 样本类型 | 血清、血浆、细胞上清液等 |
| 特色服务 | 免费代测，支持定制 |
检测原理：试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被猪蓝耳病（PRRS）病毒抗原的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪蓝耳病抗体（PRRS-Ab）病毒的存在与否。
样品收集、处理及保存方法：
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
小鼠蓝耳病抗体(PRRS-Ab)ELISA检测试剂盒组成：
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
阴性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
阳性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
检测抗原-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
小鼠蓝耳病抗体(PRRS-Ab)ELISA检测试剂盒操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；
4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗原100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
技术小提示：
1. 当混合或重溶蛋白溶液时，尽量避免起沫。
2. 为了避免交叉感染，配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。
3. 每次孵育时，请正确使用封板胶可保证结果的准确性。
4. 混合后的显色底物在上板前应为无色，请避光保存；假如微孔板后，将由物色变成不同深度的蓝色。
5. 终止液上板顺序应同显色底物上板顺序一致；加入终止液后，孔内颜色由蓝变黄；若孔内有绿色，则表明孔内液体未混匀；请充分混合。
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