人肿瘤坏死因子α转化酶科研ELISA试剂盒

【产品用途】：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中人肿瘤坏死因子α转化酶的含量。凡订购我司任意一款试剂盒均享受免费代测服务，欢迎咨询、订购！

产品详情：

【产品名称】：人肿瘤坏死因子α转化酶科研ELISA试剂盒

【产品规格】：96T/盒：可检测90个样；48T/盒：可检测42个样

【特异性】:可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。

【保存条件】：2~8℃，保质期为6个月，均提供最新批次。

【待检样本】：组织匀浆、血清、血浆、尿液、脑脊液、胸腹水、细胞培养上清等相关液体样本。

【产品特点】：灵敏度高，反应性快，操作简单。

【适用范围】：仅供科学研究使用，不得用于临床。

【特色服务】：免费代测，支持定制

实验材料与试剂配制：

1.  仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。

2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

样品收集、处理及保存：

【细胞培养上清】：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。

【血清】：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。

【血浆】：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。

 【体液】：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。

 【样本要求】：样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

 【样本保存】：如果样品不能立即检测，应将其分装，-80 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人肿瘤坏死因子α转化酶科研ELISA试剂盒组成及试剂配备：（检测范围请参考说明书）

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注意事项：

1）严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果，所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃，使用后立即冷藏保存试剂。

2）洗板不正确可以导致不准确的结果，在加入底物前确保尽量吸干孔内液体，温育过程中不要让微孔干燥。

3）消除底板残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4）底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5）避免试剂盒标本的交叉污染以免造成错误结果。

6）任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体，避免影响试剂中的生物活性。

7）平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

 关于做ELISA标准曲线时需要注意的细节问题：

1. 设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能覆盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度*陡段，即曲线几乎成直线的范围内。

2. 检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。

3. 标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。

4. 做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数R至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至时0.999.

5. 样品的浓度等指标时根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作时比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。

6. *采用倍比稀释法配置标准曲线中的标准品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。

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