大鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)ELISA检测试剂盒

【葡萄糖-6-磷酸酶简介】：主要存在于肝脏、肾 脏、 小肠粘膜细胞、胰岛细胞中，催化 6-磷酸葡萄糖水解为葡萄糖的关键酶，该反应是糖原分 解和糖异生的最后一步反应。在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被葡萄糖-6-磷酸酶（G6PC）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的葡萄糖-6-磷酸酶（G6PC）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。

大鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)ELISA检测试剂盒组成：（检测范围请参考说明书）

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实验前准备要点：

1.     准备各种实验仪器及材料（如：37℃恒温箱，450nm酶标仪、高速离心机、高精度加样器及枪头等等）

2.     按照生物实验室安全防护条例，穿着实验服并佩戴乳胶手套做好防护工作

3.     使用前应将试剂盒内各试剂取出，平衡至室温（至少30分钟）

4.     严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为准。

实验所需自备试验器材：

1.      酶标仪（450nm）

2.      高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒温箱

4.      蒸馏水或去离子水

大鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)ELISA检测试剂盒注意事项：

1.  实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。

2.  加样：加样时，要控制加样速度，避免第一孔与最后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响实验的准确性以及重复性。

3.  孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。 

4.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。

5.  建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。 

6.  建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商联系，如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。

 安全性 ：

1． 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

为了帮助您更好的解决在实验中可能碰到的各种问题，上海轩泽康生物设计了这些问题指导，配以试剂盒内的说明书一起供您参考使用：

1.     问：ELISA试剂盒是否可以分批使用？

上海轩泽康生物解析：可以分批使用，试剂盒内酶标板都是可拆卸的。

2.     问：ELISA实验整个过程需要多久？

上海轩泽康生物解析：从实验方法来看，双抗体夹心法实验需要约3.5~4小时，竞争法实验需要2-2.5小时。这个时间是单纯的上机时间，不包括样本采集时间和样本处理时间。

3.     问：说明书上的检测限不适用怎么办？

上海轩泽康生物解析：我们的试剂盒检测限都是根据常规样本定标，如遇低于检测限的特殊样本可以联系我司客服咨询定制检测限。

4.     问：为什么建议样本和标曲做复孔？

上海轩泽康生物解析：①求平均值，确保实验结果的准确性。②防止跳孔。③对自己的操作进行评估。④对试剂盒性能进行评估。

5.     问：样本反复冻融对ELISA测试结果有影响吗？

上海轩泽康生物解析：尽量避免反复冻融，收集处理完样本后分装冷冻。多次冻融易引起蛋白降解，测试出值水平下降，相对趋势减小。

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