人抗蛋白C抗体(aPC)ELISA检测试剂盒 定性

人抗蛋白C抗体(aPC)ELISA检测试剂盒 定性在国内众多实验室被广泛使用，深受广大科研者的好评。上海轩泽康生物专ye供应酶联免疫分析试剂盒，部分现货供应产品有人、大鼠、小鼠、兔、猪、犬、鸡、猴、植物等ELISA试剂盒。所有elisa试剂盒均提供免费代测，实验全程提供技术指导。欢迎咨询、订购！

一.   检测原理：试剂盒采用一步间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗原的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人抗蛋白C抗体（aPC）的存在与否。

二. 96T试剂盒组成及其配置：

①微孔酶标板（ 12 孔×8 条）；

②阴性对照 0.5mL；

③阳性对照 0.5mL；

④检测抗原-HRP 10mL；

⑤20×洗涤缓冲液 25mL；

⑥稀释液 6mL；

⑦底物 A 6mL；

⑧底物 B 6mL；

⑨终止液 6mL；

⑩封板膜 2 张；说明书 1 份；自封袋 1 个.

备注：20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

三. 人抗蛋白C抗体(aPC)ELISA检测试剂盒 定性操作步骤:

①从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。

②设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各 50μL；

③待测样本孔先加待测样本 10μL，再加稀释液 40μL；

④随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

⑤弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。

⑥每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

⑦每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的OD 值。

四. 实验结果判断：

①试验有效性：阳性对照孔 OD 值平均值≥1.00； 阴性对照孔 OD 值平均值≤0.15。

② 临界值（Cut off）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15

③阴性判断：样品 OD 值＜临界值（Cut off），样品为阴性

④阳性判断：样品 OD 值＞临界值（Cut off），样品为阳性

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