土壤酸性磷酸酶(ACP)ELISA检测试剂盒 活性

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检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被酸性磷酸酶（ACP）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的酸性磷酸酶（ACP）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。

试剂盒组成及试剂配制：

1. 酶标板（Microelisa stripplate）：一块（96孔或者48孔）

2. 标准品（Standard）：0.3ml*6管或者0.3ml*6管

3. 本稀释液（Sample Diluent）：6ml或者3ml

4. 检测抗体-HRP（HRP-Conjugate reagent）：10ml或者5ml

5. 20x洗涤缓冲液（20X Wash solution）：25ml或者15ml（按说明书进行稀释）

6. 底物A（Chromogen Solution A）：6ml或者3ml

7. 底物B（Chromogen Solution B）：6ml或者3ml

8. 终止液（Stop Solution）：6ml或者3ml

9. 封板膜（Closure plate membrane）：2张

10. 说明书（User manual）：1份

11. 自封袋（Sealed bags）：1个

土壤酸性磷酸酶(ACP)ELISA检测试剂盒 活性操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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