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内脂素(Visfatin)ELISA试剂盒如何使用?

更新时间:2023-04-12 浏览次数:415

  内脂素(Visfatin)ELISA试剂盒是一种专为测定内脂素水平而设计的试剂盒,使用ELISA技术,通过检测标本中的内脂素与试剂盒中的特异性抗体结合的程度,来量化内脂素的浓度。
 
  内脂素(Visfatin)ELISA试剂盒的使用方法:
 
  一、试剂盒的准备
 
  首先要准备好内脂素ELISA试剂盒,并保持试剂盒内各组分的完整性,确保试剂盒的质量。同时,要在试剂准备前将冰箱温度恢复到4℃以下,并将冷藏试剂和冻干试剂先放在室温下化解和恢复。
 
  二、标本收集与处理
 
  标本采集要采用专用的采血管或采血器,如EDTA抗凝血管等,并确保样本接触空气的时间尽量缩短。采集的标本应在2小时内离心分离清除血细胞,收集上清液并储存成小分装,迅速置于-80℃或液氮保存,不可重复冻融。
 
  三、试剂的稀释
 
  根据不同的样本种类确定需要稀释的试剂,将稀释好的试剂准备好,并放在准备好的试剂管中,保证稀释液的稳定性和一致性。
 
  四、装板操作
 
  将准备好的标准品和样本加入到各快板微孔中,一定要按照试剂盒说明书中的规定加样,否则会影响最终的结果,并将加入标本的玻璃纸进行标记。加样完毕后,将微孔板封闭,进行震荡和旋转半小时,以保证标本中的内脂素与特异性抗体结合。
 
  五、发色反应
 
  将孔板中的样本液倒掉,用洗板液洗板三次,以清洗掉微孔板内的杂质,并在板上每个孔口滴加适量的发色液,分别进行震荡和旋转。发色时间一般为15-20min,根据试剂盒说明书中的规定记时。发色结束后,停止发色反应,加入停色液,并进行震荡和旋转,停止反应。
 
  六、检测结果的测定和记录
 
  通过读板仪检测不同孔口的发色结果,测定各标准品及样本的OD值,并通过标准曲线进行计算,得到相应的内脂素浓度。最后将结果记录下来,以便后续的数据分析和绘制。
 
  综上所述,内脂素ELISA试剂盒是一种很常用的检测内脂素浓度的试剂盒,可广泛应用于生物医学、临床实验室及科研领域。在使用该试剂盒时,应严格按照说明书的规定进行准备试剂、收集样本、稀释试剂、装板操作和结果测定等步骤,以确保实验结果准确可靠。
 

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