一文搞定胰岛素（INS）ELISA试剂盒的操作方法

更新时间：2022-10-25 浏览次数：782

　　胰岛素(INS)ELISA试剂盒的操作步骤：

　　1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

　　3、待测样本孔先加样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白孔不加。

　　4、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

　　6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7、每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　胰岛素(INS)ELISA试剂盒的操作注意事项：

　　(1)试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。

　　(2)实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封(低温干燥)保存。

　　(3)浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白，按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

　　(4)严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

　　(5)所有液体组分使用前充分摇匀。